液體菌種發(fā)酵罐的使用操作技術:
800升液體罐,,蒸汽滅菌,、內(nèi)置濾芯,外加層,,螺桿空壓機+冷干機提供氣源,。
1:新罐、染菌罐,、換品種,、長期不用的罐都要進行空滅(所謂的空滅是指不加培養(yǎng)料滅菌)
加純凈水,水位到上試鏡一半即可,,開始鏈接蒸汽進行升溫,,記住滅菌前水位與滅菌后水位的增加高度,升溫126度壓力保持0.15保持30分鐘,,關閉所有排氣閥與進氣閥,,當壓力自然降到0時,打開排氣閥,,進行排水,,空滅結束。(建議提前一天進行空滅,,第二天排水)
2:進行給液體罐加純凈水,,留出蒸汽上升的高度,培養(yǎng)時液體的高度在上試鏡上方8---10㎝為宜,,空滅時候已經(jīng)知道水位上升的高度,,所以這次加水的位置在試鏡上方8---10㎝處去掉蒸汽上升的高度,就是你正常的水位。鍋爐分氣缸的壓力保持0.3---0.4,,這樣做完的培養(yǎng)液的高度是理想的高度,。
3:純凈水加到高度后,打開進氣閥門攪拌冷水,,進行秤培養(yǎng)料,把所有培養(yǎng)料秤好后倒入罐內(nèi)(注:別忘記放消泡劑)擰緊倒料口的蓋子,,打開排氣閥門,,準備滅菌培養(yǎng)料。
4:打開分氣缸的污水閥門,,把管道內(nèi)部的污水排凈,,直到冒出蒸汽時排污閥即可關閉,檢查蒸汽管道鏈接是否鏈接安全,,檢查確認后打開分氣缸閥門,,管道內(nèi)蒸汽充滿后打開液體罐進蒸汽的閥門開始進行升溫滅菌。升溫到90----95度時關閉進氣閥門停止進氣攪拌,。(注:一直通著空氣是為了攪拌培養(yǎng)料融化均勻,,二:蒸汽遇見冷水發(fā)出的噪音會減小。)95度時噪音減小后關閉進氣閥,,100度時排氣閥關小微開,。?
5:檢查溫度顯示是否與罐體上的壓力吻合(醫(yī)用壓力表外圈帶有溫度)如果不一致可以調(diào)節(jié)排氣閥的大小進行吻合。直到壓力到0.15溫度126度,。
6:開始進行像濾芯內(nèi)通蒸汽,,(注:目的是為了叫濾芯內(nèi)部潮濕,延長濾芯壽命與滅菌,,二是為了叫濾芯內(nèi)部空氣流動,,擠壓停留死角的冷空氣達到滅菌的效果)
7:開始計時,保持壓力停留在0.14--0.15,,溫度126度,,計時60分鐘。
8:計時結束后,,先關閉罐體的蒸汽閥,,在關閉鍋爐分氣缸上面的閥門,(注:按順序關閉閥門)閥門關閉后待蒸汽管道壓力自然冷卻后,,開始鏈接外加層的循環(huán)水,,采用低進高出的鏈接方式,在外加層下方鏈接進水,。
9:打開排水閥門后,,開始打開冷水閥門進行外加層循環(huán)水給罐內(nèi)培養(yǎng)液降溫,看壓力自然降到0.1以下,調(diào)節(jié)油水分離器的調(diào)節(jié)閥,,當油水分離器壓力表的壓力大于液體灌壓力時,,打開通往罐內(nèi)濾芯的閥門,進行給液體罐內(nèi)培養(yǎng)液攪拌降溫,,溫度降到26---28度時即可停止外加層進水冷卻,。
10:將做好檢測無異樣的搖瓶取來,停止液體發(fā)酵罐房間的所有空氣流動,,接種口周圍用75%的酒精噴灑消毒,,將火焰圈盤在接種口一圈,迅速打開排氣閥,,當壓力掉到0.01時打開接種蓋同時關閉排氣閥,。(接種閥一直又壓力向外流動以免雜菌進入)拿起搖瓶輕輕搖動幾圈,在火焰圈上方燒灼瓶口,,取下瓶塞,,快速將搖瓶種倒入罐內(nèi),燒灼接種蓋擰緊接種蓋,,接種結束(往罐內(nèi)倒入搖瓶時,,速度越快動作越輕為佳)
11:接種結束后調(diào)節(jié)液體罐的進氣量,壓力調(diào)節(jié)在0.02---0.04之間既可以,,記住接種時間與日期,。這個液體罐制作完畢。
不同液體罐不同操作方法,,但是原理相同,。